本書以表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)、熒光成像技術(shù)作為主要的分析和檢測手段，結(jié)合納米材料的優(yōu)勢，構(gòu)建了一系列還原酶激活的功能化納米探針用于分析和檢測缺氧微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞內(nèi)的變化。本書研究了缺氧條件下腫瘤細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的變化及標(biāo)志物的檢測，為設(shè)計缺氧相關(guān)的探針和檢測腫瘤標(biāo)志物提供了有價值的指導(dǎo)思想。通過缺氧細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)的還原性物質(zhì)激活探針，檢測某細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)或者組分的變化，這些設(shè)計理念具有一定的通用性和拓展前景。
第1章 緒論
1.1 引言
1.2 缺氧微環(huán)境引起腫瘤細(xì)胞的異常變化
1.2.1 蛋白質(zhì)表達(dá)異常
1.2.2 維生素C代謝的差異
1.2.3 CO分子上調(diào)
1.2.4 活性氧（ROS）含量的升高
1.2.5 外泌體的異常
1.3 腫瘤缺氧的危害和常見的檢測方法
1.3.1 光學(xué)檢測
1.3.2 PET檢測
1.3.3 MRI檢測
1.3.4 光聲檢測
1.4 功能化納米探針及其在腫瘤缺氧微環(huán)境中的應(yīng)用
1.4.1 功能化納米探針的簡介
1.4.2 功能化納米探針在腫瘤缺氧微環(huán)境中的應(yīng)用
1.5 本論著的選題依據(jù)和研究內(nèi)容
第2章 激活式SERS納米探針用于檢測缺氧誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞酸化
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 試劑和儀器
2.2.2 AuNRs的制備
2.2.3 AuNR@4-NTP的制備
2.2.4 AuNR@4-NTP@CPPs的制備
2.2.5 SERS納米探針在溶液相中的反應(yīng)
2.2.6 細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
2.2.7 暗場顯微鏡成像
2.2.8 細(xì)胞內(nèi)pH的標(biāo)定
2.2.9 細(xì)胞內(nèi)SERS比率成像
2.2.10 肺癌組織SERS比率成像
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計原理
2.3.2 實(shí)驗(yàn)可行性的考察
2.3.3 AuNR@4-NTP納米探針的構(gòu)建
2.3.4 SERS納米探針對NTR的響應(yīng)分析
2.3.5 SERS納米探針選擇性的考察
2.3.6 SERS納米探針對pH的響應(yīng)分析
2.3.7 SERS納米探針毒性及運(yùn)載效率的考察
2.3.8 細(xì)胞內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建
2.3.9 pHi與含氧量之間關(guān)系
2.3.10 肺癌組織酸化考察
2.4 小結(jié)
第3章 基于偶氮還原酶響應(yīng)的膠束用于缺氧誘導(dǎo)的線粒體自噬成像
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 試劑和儀器
3.2.2 Mito-rHP的合成與表征
3.2.3 兩親性聚合物的合成與表征
3.2.4 Micelle@Mito-rHP（MCM）的制備與功能化
3.2.5 十六烷基胺共軛連接Ce6的合成與表征
3.2.6 臨界膠束濃度（CMC）的測定
3.2.7 缺氧響應(yīng)的考察
3.2.8 細(xì)胞培養(yǎng)和毒性考察
3.2.9 細(xì)胞線粒體共定位成像和pH標(biāo)定
3.2.10 細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬成像
3.2.11 PDT過程中細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬成像
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 探針Mito-rHP的合成與表征
3.3.2 膠束對缺氧的響應(yīng)分析
3.3.3 細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬成像
3.3.4 特異性的考察
3.3.5 PDT過程中線粒體自噬成像
3.4 結(jié)論
第4章 雙激活的熒光探針用于缺氧誘導(dǎo)的線粒體自噬成像
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 試劑和儀器
4.2.2 探針的合成與表征
4.2.3 光譜測量
4.2.4 細(xì)胞毒性考察
4.2.5 細(xì)胞成像
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 探針的設(shè)計原理
4.3.2 可行性研究
4.3.3 pH滴定實(shí)驗(yàn)
4.3.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
4.3.5 選擇性的考察
4.3.6 探針性能的比較
4.3.7 細(xì)胞毒性與自噬成像
4.3.8 探針成像的研究
4.4 結(jié){侖
第5章 基于sERs定量檢測缺氧腫瘤細(xì)胞外泌體中miieroRNA的含量
5.1 引言
5.2 實(shí)驗(yàn)部分
5.2.1 試劑和儀器
5.2.2 金納米顆粒的合成
5.2.3 SERS納米標(biāo)簽的制備
5.2.4 SERS納米標(biāo)簽內(nèi)R6G含量的測定
5.2.5 基底增強(qiáng)因子的測量
5.2.6 SERS傳感體系的制備
5.2.7 SiMB表面ARANPs的含量測定
5.2.8 聚丙酰胺凝膠電泳（PAGE）
5.2.9 外泌體的提取
5.2.10 RNA的提取
5.3 結(jié)果與討論
5.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計原理
5.3.2 中空SERS納米標(biāo)簽的表征
5.3.3 實(shí)驗(yàn)可行性的研究
5.3.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
5.3.5 miRNA的檢測
5.3.6 缺氧外泌體中miRNA的檢測
5.4 結(jié)論
第6章 比率型熒光納米探針用于信號放大檢測細(xì)胞內(nèi)端粒酶的活性
6.1 引言
6.2 實(shí)驗(yàn)部分
6.2.1 試劑和儀器
6.2.2 QDSA@DNA納米探針的制備
6.2.3 瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
6.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)和端粒酶的提取
6.2.5 溶液相端粒酶活性的檢測
6.2.6 細(xì)胞內(nèi)端粒酶活性的檢測
6.3 結(jié)果與討論
6.3.1 QDSA@DNA納米探針的表征
6.3.2 可行性的驗(yàn)證
6.3.3 端粒酶活性的檢測
6.3.4 QDSA@DNA穩(wěn)定性和特異性的研究
6.3.5 端粒酶成像的研究
6.3.6 端粒酶活性的檢測
6.4 結(jié)論
第7章 一種新型近紅外熒光探針用于端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶的成像
7.1 引言
7.2 實(shí)驗(yàn)部分
7.2.1 試劑與儀器
7.2.2 熒光探針NB-BIBRA的合成與表征
7.2.3 熒光探針NB-BIBRA溶液相的性能研究
7.2.4 聚丙烯酰胺凝膠電泳
7.2.5 細(xì)胞內(nèi)hTERT的熒光成像
7.2.6 活體組織及體內(nèi)hTERT的成像
7.3 結(jié)果與討論
7.3.1 NB-BIBRA的設(shè)計與制備
7.3.2 NB-BIBRA對hTERT響應(yīng)機(jī)制的研究
7.3.3 溶液相hTERT的檢測
7.3.4 腫瘤細(xì)胞內(nèi)hTERT的成像
7.3.5 組織和活體內(nèi)hTERT的
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