本書(shū)主要介紹了分子生物學(xué)在食品領(lǐng)域的應(yīng)用及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)、核酸的結(jié)構(gòu)與功能、核酸分離與純化等基礎(chǔ)知識(shí)，進(jìn)而介紹了分子生物學(xué)經(jīng)典技術(shù)—基因擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)和重組DNA技術(shù)相關(guān)理論知識(shí)以及酶聯(lián)免疫和蛋白質(zhì)分析技術(shù)。本書(shū)實(shí)踐部分采用“一體式串聯(lián)”法，以玉米轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)為主線，將玉米DNA提取、核酸電泳、核酸純度檢測(cè)和PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成分甚至熒光定量PCR測(cè)抗除草劑pat基因表達(dá)量串聯(lián)起來(lái)，知識(shí)銜接緊密，提高技能學(xué)習(xí)效率。重組DNA技術(shù)類(lèi)實(shí)驗(yàn)，將pat基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，構(gòu)建重組菌株，然后進(jìn)行重組菌株的篩選、外源蛋白的表達(dá)檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)串聯(lián)起來(lái)，作為轉(zhuǎn)基因植物的上游操作實(shí)驗(yàn)，可以讓學(xué)生很系統(tǒng)地掌握重組DNA技術(shù)的相關(guān)知識(shí)和操作技能，理解基因工程操作的整個(gè)過(guò)程。在本書(shū)的指導(dǎo)下進(jìn)行教學(xué)，可實(shí)現(xiàn)一個(gè)學(xué)期完成一項(xiàng)較為完整的基因檢測(cè)項(xiàng)目和構(gòu)建出一個(gè)轉(zhuǎn)基因菌株的成果。

緒論 001
一、分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史 001
二、分子生物學(xué)的概念和研究?jī)?nèi)容 011
三、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí) 014
知識(shí)小結(jié) 020
能力測(cè)驗(yàn) 020

模塊一 核酸分離純化技術(shù) 022
項(xiàng)目一 基因組DNA的提取與純化 023
必備知識(shí) 023
一、DNA的結(jié)構(gòu) 023
二、DNA的理化性質(zhì) 026
三、DNA的提取與鑒定保存 026
技能訓(xùn)練 032
實(shí)訓(xùn)1 玉米基因組DNA的分離與純化 032
實(shí)訓(xùn)2　瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) 035
知識(shí)小結(jié) 037
能力測(cè)驗(yàn) 038
項(xiàng)目二　RNA的提取與純化 039
必備知識(shí) 039
一、RNA的結(jié)構(gòu) 039
二、RNA的種類(lèi) 040
三、RNA的提取 043
技能訓(xùn)練 046
實(shí)訓(xùn)3　玉米總RNA的分離與純化 046
知識(shí)小結(jié) 049
能力測(cè)驗(yàn) 049
項(xiàng)目三　質(zhì)粒的提取與純化 051
必備知識(shí) 051
一、質(zhì)粒 051
二、質(zhì)粒的抽提和檢測(cè) 052
技能訓(xùn)練 054
實(shí)訓(xùn)4 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的分離與純化 054
知識(shí)小結(jié) 058
能力測(cè)驗(yàn) 058

模塊二　基因擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù) 061
項(xiàng)目一　聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 062
必備知識(shí) 062
一、PCR技術(shù)基本原理 063
二、PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件 064
三、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析 068
四、PCR常見(jiàn)問(wèn)題 068
技能訓(xùn)練 069
實(shí)訓(xùn)5 PCR法檢測(cè)玉米中的轉(zhuǎn)基因成分 069
知識(shí)小結(jié) 073
能力測(cè)驗(yàn) 074
項(xiàng)目二　熒光定量PCR技術(shù) 075
必備知識(shí) 075
一、熒光定量PCR技術(shù)基本原理 076
二、熒光標(biāo)記方式 078
三、模板的定量方式 080
四、熒光定量PCR常見(jiàn)問(wèn)題 081
技能訓(xùn)練 083
實(shí)訓(xùn)6 熒光定量PCR法檢測(cè)大豆中的轉(zhuǎn)基因成分 083
知識(shí)小結(jié) 086
能力測(cè)驗(yàn) 087

模塊三　重組DNA技術(shù) 090
項(xiàng)目一　重組DNA的常用載體和工具酶 091
必備知識(shí) 091
一、常用的分子克隆載體 091
二、分子克隆使用的工具酶 101
技能訓(xùn)練 110
實(shí)訓(xùn)7 限制性核酸內(nèi)切酶酶切 110
實(shí)訓(xùn)8 DNA的連接 113
知識(shí)小結(jié) 114
能力測(cè)驗(yàn) 115
項(xiàng)目二　重組DNA的基本步驟 117
必備知識(shí) 117
一、目的基因的制備 118
二、選擇、構(gòu)建載體 119
三、連接載體與目的基因 119
四、將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞 120
五、重組DNA分子的篩選與鑒定 121
六、外源基因的表達(dá)、分離與純化 122
技能訓(xùn)練 123
實(shí)訓(xùn)9 重組質(zhì)粒DNA分子轉(zhuǎn)入大腸桿菌 123
實(shí)訓(xùn)10 藍(lán)白斑法篩選重組菌 125
知識(shí)小結(jié) 127
能力測(cè)驗(yàn) 128

模塊四　ELISA技術(shù) 129
項(xiàng)目　酶聯(lián)免疫反應(yīng)的基本原理和操作 130
必備知識(shí) 130
一、ELISA基本原理 130
二、ELISA類(lèi)型 132
三、ELISA酶與底物 136
四、ELISA操作要點(diǎn) 137
五、ELISA反應(yīng)條件的選擇 142
技能訓(xùn)練 143
實(shí)訓(xùn)11 ELISA檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品中CP4 EPSPS蛋白 143
知識(shí)小結(jié) 147
能力測(cè)驗(yàn) 148

模塊五　蛋白質(zhì)分離、純化與分析技術(shù) 149
項(xiàng)目　蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù) 150
必備知識(shí) 150
一、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 150
二、蛋白質(zhì)的分離純化方法及其原理 151
三、蛋白質(zhì)的凝膠電泳技術(shù) 156
技能訓(xùn)練 164
實(shí)訓(xùn)12 聚丙烯酰胺凝膠電泳 164
【知識(shí)拓展】　蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（Western blotting） 167
一、Western印跡技術(shù)的基本原理 167
二、Western印跡技術(shù)的基本操作 167
知識(shí)小結(jié) 172
能力測(cè)驗(yàn) 172

參考文獻(xiàn) 174