目錄
總序
前言
第一部分 病毒學實驗
第一章 病毒的提純及濃度測定 3
實驗一 植物病毒的提純 3
實驗二 紫外分光光度法測定提純病毒的濃度 11
實驗三 動物病毒的提純和感染單位測定 15
第二章 病毒的形態(tài)學觀察 20
實驗四 負染法觀察提純的病毒 23
實驗五 免疫電鏡法檢測發(fā)病葉片中的病毒 24
實驗六 超薄切片法觀察組織中的病毒及細胞病理學變化 26
實驗七 免疫膠體金檢測細胞中病毒的分布 28
第三章 RNA病毒侵染性cDNA克隆的構建 33
實驗八 煙草花葉病毒侵染性cDNA克隆的構建 33
實驗九 豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染性cDNA克隆的構建 42
實驗十 單引物擴增技術獲得病毒基因組全序列 49
第四章 病毒的分子生物學檢測技術 57
實驗十一 RT-PCR檢測植物葉片中的特定病毒 62
實驗十二 病毒的斑點雜交檢測 67
實驗十三 病毒的Northern blotting檢測技術 71
實驗十四 病毒的實時熒光定量PCR檢測 75
實驗十五 反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導的等溫擴增技術檢測病毒 86
第五章 病毒的血清學檢測技術 94
實驗十六 植物病毒抗血清效價的測定 96
實驗十七 瓊脂雙擴散反應檢測植物病毒 98
第二部分 免疫學實驗
第六章 實驗動物 103
實驗動物簡介 103
實驗十八 實驗動物采血方法 114
實驗十九 實驗動物免疫方法 116
實驗二十 常用免疫學實驗動物模型的建立 120
第七章 細胞培養(yǎng)技術 133
實驗二十一 細胞的傳代與細胞計數(shù) 136
實驗二十二 細胞的凍存與復蘇 139
實驗二十三 樹突細胞的誘導及培養(yǎng) 142
第八章 抗體制備及檢測技術 144
實驗二十四 兔抗血清制備 144
實驗二十五 單克隆抗體的制備 146
實驗二十六 抗體的純化 153
實驗二十七 血凝和血凝抑制實驗 154
實驗二十八 酶聯(lián)免疫吸附實驗 156
實驗二十九 免疫電泳實驗 159
實驗三十 蛋白免疫印跡實驗 162
實驗三十一 免疫組織化學實驗 164
實驗三十二 細胞免疫熒光實驗 167
第九章 補體實驗 170
實驗三十三 補體與補體單位的滴定實驗 170
實驗三十四 溶血素制備與補體參與的溶血反應 172
實驗三十五 補體介導的細胞毒實驗 175
第十章 淋巴細胞分離純化 177
實驗三十六 制備免疫細胞懸液 177
實驗三十七 密度梯度離心法分離外周血液中的白細胞 181
實驗三十八 脾臟不同免疫細胞磁珠分選實驗 183
第十一章 免疫細胞熒光染色流式細胞儀檢測 188
實驗三十九 免疫細胞表面分子檢測 188
實驗四十 胞內(nèi)細胞因子表達檢測 192
實驗四十一 Annexin V/PI雙熒光染色檢測細胞凋亡 194
第十二章 免疫細胞功能實驗 197
實驗四十二 淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗 197
實驗四十三 混合淋巴細胞反應 199
實驗四十四 T細胞增殖實驗——MTT法 201
實驗四十五 T細胞增殖實驗——3H-TdR摻入法 204
實驗四十六 T細胞增殖實驗——CFSE染色法 206
實驗四十七 體外CTL實驗 208
實驗四十八 體內(nèi)CTL實驗 211
實驗四十九 酶聯(lián)免疫斑點實驗 214
實驗五十 B細胞增殖實驗 216
實驗五十一 B細胞溶血空斑實驗 218
實驗五十二 NK細胞殺傷活性實驗——乳酸脫氫酶釋放法 220
實驗五十三 NK細胞殺傷活性檢測——MTT 比色法 222
實驗五十四 NK細胞殺傷活性實驗——51Cr釋放法 223
附錄一 常用血液抗凝劑的配制及用法 226
附錄二 常用消毒液的配制及用途 228
附錄三 常用試劑和溶液的配制 229