分子生物學(xué)及基因工程實(shí)驗(yàn)教程(第三版)
定 價(jià):20 元
叢書名:能力培育型生物學(xué)基礎(chǔ)課系列實(shí)驗(yàn)教材
- 作者:劉箭主編
- 出版時(shí)間:2015/1/1
- ISBN:9787030428615
- 出 版 社:科學(xué)出版社
- 中圖法分類:Q7-33
- 頁(yè)碼:71
- 紙張:膠版紙
- 版次:3
- 開本:16K
本書介紹了常用的分子生物學(xué)和基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)。全書分為三部分,第一部分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn),介紹了一些簡(jiǎn)明且獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)方案,每個(gè)實(shí)驗(yàn)可在半日內(nèi)完成,且成功率高,因此特別適用于有關(guān)專業(yè)的本科實(shí)驗(yàn)教學(xué);第二部分為綜合性實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)略微復(fù)雜,適用于有一定基礎(chǔ)的高年級(jí)本科生實(shí)驗(yàn)教學(xué);最后一部分為研究型實(shí)驗(yàn),為培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立科研工作能力提供了更加貼近科研工作的實(shí)驗(yàn)方案
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《分子生物學(xué)及基因工程實(shí)驗(yàn)教程(第三版)》:
第一部分 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)1 質(zhì)粒的分離——堿裂解法
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?br />
1.學(xué)習(xí)堿法分離質(zhì)粒的基本原理。
2.掌握堿法分離質(zhì)粒的操作方法。
【實(shí)驗(yàn)原理】
質(zhì)粒是染色體之外裸露的、具有自主復(fù)制能力的、以超螺旋狀態(tài)存在于細(xì)胞內(nèi)的雙鏈DNA 分子。質(zhì)粒的分離是分子生物學(xué)研究中最基本的技術(shù),目前提取質(zhì)粒的方法很多,比如CsCl梯度離心法、煮沸法、硅石粉法、堿裂解法等。本實(shí)驗(yàn)所用的堿裂解法是一種經(jīng)典的分離質(zhì)粒DNA 的方法,其基本原理是利用染色體DNA 與質(zhì)粒DNA 在變性程度和復(fù)性速度的差異,即在pH>12的堿性條件下,大腸桿菌的基因組DNA 氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性,但在該條件下,質(zhì)粒因其具有共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn),兩條互補(bǔ)鏈間的氫鍵沒有完全被破壞,兩條鏈仍然部分地結(jié)合在一起;當(dāng)溶液的pH 回復(fù)至中性時(shí),質(zhì)粒DNA 快速?gòu)?fù)性,但是染色體DNA 由于分子很大,難以復(fù)性;在高鹽