本書在介紹蛋白質(zhì)研究基本內(nèi)容的同時,又能反應該領域快速發(fā)展的新技術和成果。本書在內(nèi)容和結構上采用基礎理論和實驗操作兩部分相結合,并以基礎理論為主的編排處理,并在每一章內(nèi)容中都包含了當前的一些最新進展;A理論部分包括十五章,第二至第六章詳細介紹了蛋白質(zhì)研究的一般原則和以色譜技術為主的常用的分離純化技術的理論基礎;第七至十章內(nèi)容包含了對蛋白質(zhì)理化性質(zhì)和一級結構、空間結構的鑒定;第十一至十三章分別涉及蛋白質(zhì)相互作用的研究技術、蛋白質(zhì)和多肽的化學合成技術、蛋白質(zhì)的化學修飾技術,以便獲得某種特殊功能的蛋白質(zhì)的方法;第十四、十五章介紹了當前發(fā)展非常迅速的蛋白質(zhì)組學及一生物信息學的內(nèi)容,便于讀者了解最新的蛋白質(zhì)研究方法。實驗操作部分選取了常用的和基本的11個蛋白質(zhì)技術實驗,實驗步驟詳盡,而且每個實驗都經(jīng)過了反復實驗操作的驗證,參考價值和可重復性都非常強。最后的附錄部分收錄了蛋白質(zhì)研究中經(jīng)常用到的一些參考數(shù)據(jù),可方便查詢和使用。
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陜西省高校青年建設創(chuàng)新團隊,2019年,排名第2
目錄
第一章 緒論 1
第一節(jié) 研究蛋白質(zhì)的重要性 1
第二節(jié) 蛋白質(zhì)研究技術的發(fā)展 2
第三節(jié) 蛋白質(zhì)研究技術的主要內(nèi)容 8
參考文獻 9
第二章 蛋白質(zhì)化學及蛋白質(zhì)分離純化的基礎 10
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的分子組成 10
第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結構 14
第三節(jié) 蛋白質(zhì)結構與功能的關系 21
第四節(jié) 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 23
第五節(jié) 蛋白質(zhì)的種類和功能 27
第六節(jié) 蛋白質(zhì)純化方案設計的基本原則 31
參考文獻 34
第三章 蛋白質(zhì)提取和粗分離 35
第一節(jié) 原材料的選擇和處理 35
第二節(jié) 細胞的破碎與分離 36
第三節(jié) 蛋白質(zhì)的沉淀 40
參考文獻 52
第四章 蛋白質(zhì)層析分離 53
第一節(jié) 層析法概述 53
第二節(jié) 離子交換層析 55
第三節(jié) 凝膠過濾層析 64
第四節(jié) 疏水和反相層析 69
第五節(jié) 親和層析 73
參考文獻 76
第五章 蛋白質(zhì)電泳分離 77
第一節(jié) 電泳技術概述 78
第二節(jié) 電泳技術的類型 80
第三節(jié) 聚丙烯酰胺凝膠電泳 84
第四節(jié) 非連續(xù)緩沖系統(tǒng)聚丙烯酰胺凝膠電泳 86
第五節(jié) 等電聚焦電泳和雙向電泳 89
第六節(jié) 蛋白質(zhì)的轉移電泳 94
第七節(jié) 毛細管電泳 95
參考文獻 97
第六章 蛋白質(zhì)純化中的銜接技術 98
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的濃縮 98
第二節(jié) 蛋白質(zhì)的脫鹽 104
第三節(jié) 蛋白質(zhì)生物活性的保持 106
第四節(jié) 蛋白質(zhì)純化過程中的監(jiān)測 110
參考文獻 113
第七章 高效液相色譜和超高效液相色譜 114
第一節(jié) 基本概念 115
第二節(jié) 高效液相色譜法 117
第三節(jié) 超高效液相色譜 123
參考文獻 128
第八章 蛋白質(zhì)的鑒定技術 129
第一節(jié) 蛋白質(zhì)含量測定 129
第二節(jié) 蛋白質(zhì)純度測定 136
第三節(jié) 蛋白質(zhì)分子量測定 140
第四節(jié) 蛋白質(zhì)等電點測定 149
參考文獻 151
第九章 蛋白質(zhì)分子一級結構測定 153
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的氨基酸組成測定 153
第二節(jié) 蛋白質(zhì)的末端測定 155
第三節(jié) 亞基拆離、肽鏈降解和肽段的分離 159
第四節(jié) 肽段的氨基酸順序測定 162
第五節(jié) 氨基酸自動測序儀的工作原理 165
第六節(jié) 質(zhì)譜技術在肽和蛋白質(zhì)的序列測定中的應用 166
參考文獻 168
第十章 蛋白質(zhì)的空間結構分析 169
第一節(jié) X射線晶體學技術 170
第二節(jié) 核磁共振波譜學技術 175
第三節(jié) 電子晶體學及電子顯微鏡三維結構 177
第四節(jié) 蛋白質(zhì)空間結構預測及建模 180
參考文獻 185
第十一章 蛋白質(zhì)相互作用的研究技術 186
第一節(jié) 在異種系統(tǒng)中檢測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 186
第二節(jié) 在活細胞中檢測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 189
第三節(jié) 應用離體實驗方法檢測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 191
參考文獻 194
第十二章 蛋白質(zhì)和多肽的化學合成技術 196
第一節(jié) 多肽化學合成的基本原理 197
第二節(jié) 液相肽合成法 200
第三節(jié) 固相肽合成法 202
第四節(jié) 多肽合成儀 208
第五節(jié) 多肽合成后的裂解 222
第六節(jié) 合成多肽的分離純化及鑒定 225
第七節(jié) 多肽合成、裂解、分離純化的應用實例 226
參考文獻 234
第十三章 蛋白質(zhì)的化學修飾技術 235
第一節(jié) 化學修飾的原理與方法 235
第二節(jié) 化學修飾在醫(yī)藥領域的應用 240
第三節(jié) 蛋白質(zhì)化學修飾的展望 245
參考文獻 246
第十四章 蛋白質(zhì)組學及其研究技術 247
第一節(jié) 蛋白質(zhì)組學的產(chǎn)生及其研究目的和任務 248
第二節(jié) 蛋白質(zhì)組學研究技術與路線 251
第三節(jié) 蛋白質(zhì)組研究進展與應用 268
參考文獻 274
第十五章 生物信息學 276
第一節(jié) 生物信息學概述 276
第二節(jié) 常用的生物信息學數(shù)據(jù)庫 277
第三節(jié) 生物信息學數(shù)據(jù)的分析與挖掘 281
第四節(jié) 生物信息學在蛋白質(zhì)研究中的應用 283
參考文獻 286